circ_0001126在同型半胱氨酸导致的MPC-5细胞铁死亡中的作用
王子清1
丁宁2
杨连鹏3
王林云2
李婧睿2
王仪宾3
李桂忠2
姜怡邓2
卢冠军4
1.宁夏医科大学第一临床医学院(宁夏 银川 750004);青海省中医院外二科(青海 西宁 810000);宁夏医科大学国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室(宁夏 银川 750004)2.宁夏医科大学国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室(宁夏 银川 750004)3.宁夏医科大学第一临床医学院(宁夏 银川 750004)4.宁夏医科大学总医院泌尿外科(宁夏 银川 750004)
摘要：目的 探讨circ_0001126 在同型半胱氨酸(homocysteinemia,Hcy)导致的小鼠肾足细胞(mouse podocyte cell line-5,MPC-5)铁死亡中的作用.方法 对MPC-5细胞进行体外培养,将细胞分为Control组(0 µmol/L Hcy)、Hcy组(80 µmol/L Hcy),干预细胞48 h后,分别采用Western blot检测谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 Member 11,SLC7A11)蛋白的表达,丙二醛(malondialdehyde,MDA)试剂盒测定细胞内MDA水平,谷胱甘肽(glutathione,GSH)检测试剂盒测定细胞内GSH水平,荧光法检测试剂盒观察细胞内Fe2+水平;高通量测序筛选对照组及Hcy组足细胞中特异性环状RNA(circular RNA,circRNA),并以定量逆转录聚合酶链式反应(quantitative Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR)验证.生物信息学预测染色体位置及保守性.转染si-circ_0001126 及其阴性对照(si-NC)后,Western blot及qRT-PCR分别检测GPX4、SLC7A11 蛋白及其mRNA表达情况,丙二醛试剂盒测定细胞内MDA水平,GSH检测试剂盒测定细胞内GSH水平,荧光法检测试剂盒观察细胞内Fe2+水平.结果 与Control组相比,Hcy组中铁死亡相关蛋白GPX4、SLC7A11表达降低(P<0.001),Fe2+、MDA表达水平升高(P<0.001),而GSH水平降低(P<0.001);高通量测序发现Hcy组中共有12个表达差异的circRNAs,其中上调的8个,下调的4个,根据|log2foldchange|(≥2)和P值(P<0.05),筛选出circ_0001126,qRT-PCR验证其Hcy组中表达上调(P<0.001),与测序结果一致.UCSC Genome Browser Gateway和circbase分析发现circ_0001126主要位于chr3:51659420-51660998,由Maml3基因第2外显子环化形成且具有高度保守性.转染si-circRNAs,发现si-circ_0001126-309干扰效率最佳(P<0.001).与Hcy+si-NC组相比,Hcy+si-circ_0001126组铁死亡相关蛋白GPX4、SLC7A11表达升高(P<0.001),Fe2+、MDA表达水平降低(P<0.001),而GSH水平升高(P<0.001).结论 circ_0001126在Hcy处理的MPC-5细胞中显著增高,降低其表达可抑制Hcy引起的MPC-5细胞铁死亡.
关键词：circ_0001126同型半胱氨酸慢性肾脏病足细胞铁死亡
分类号：R692.5(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)
资助基金：国家科技重大专项(2024ZD0531200)国家自然科学基金(82571009)宁夏回族自治区重点研发计划重点项目(2023BEG02074)宁夏医科大学校级重点项目(XJKF240311)
论文发表日期：2026-01-25
在线出版日期：2026-01-28（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：11( 201-211 )
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