牛磺熊去氧胆酸通过调控TBC1D15改善线粒体自噬减轻氧糖剥夺心肌细胞损伤的机制
廖玮嫣
赵倩
陈泽屿
宣悦
熊胜涛
李东霖
王萧
广州中医药大学中西医结合基础研究中心(广东 广州 510006)
摘要：目的 探讨牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)通过特异性调控TBC1D15蛋白表达和定位,恢复线粒体自噬功能,从而减轻氧糖剥夺(OGD)诱导的心肌细胞损伤的作用机制.方法 采用传代心肌细胞H9c2OGD模型,设置正常对照组、模型组及TUDCA低(20 μmol/L)、中(40 μmol/L)、高(80 μmol/L)剂量干预组.通过免疫荧光检测TBC1D15亚细胞定位与表达,YO-PRO-1/PI双染评估细胞凋亡/坏死,溶酶体染色检测溶酶体功能并使用HBAD-mcherry-EGFP-LC3检测细胞自噬活性,Western blot分析自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、p62及凋亡蛋白Bcl-2的表达情况.结果 与正常对照组相比,模型组TBC1D15表达显著降低且分布紊乱;经TUDCA干预后,TBC1D15 表达呈剂量依赖性恢复,高剂量组荧光强度接近正常对照组水平,且细胞膜定位明显增强.在自噬相关指标方面,TUDCA 中、高剂量组显著促进自噬活化,具体表现为LC3-Ⅱ/Ⅰ比值升高、p62 降解加速以及Beclin-1表达增加.细胞凋亡/坏死检测结果显示,模型组细胞凋亡/坏死显著增加,而 TUDCA 干预后,细胞凋亡/坏死情况明显改善,同时抗凋亡蛋白Bcl-2表达上调,且这种改善效果在高剂量组最为显著.结论 TUDCA通过剂量依赖性方式恢复TBC1D15蛋白的膜定位,进而激活线粒体自噬通路,最终协同抑制细胞凋亡/坏死.
关键词：牛磺熊去氧胆酸线粒体自噬TBC1D15氧糖剥夺心肌细胞损伤
分类号：R541(心脏、血管（循环系）疾病)
资助基金：广东省普通高校重点领域专项项目(2022A1515010380)广州中医药大学校院联合科技创新基金项目(GZYZS2024U04)
论文发表日期：2026-01-25
在线出版日期：2026-01-28（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 220-229 )
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