DOI: 10.11958/20251997
SARS-CoV-2 B.1.1.7核衣壳蛋白突变与宿主天然免疫应答及COVID-19临床状态的相关性
何先珍1
付亚男2
尤婉玲3
耿澳华3
孙晓光3
曾凤3
刘龙4
1.十堰市人民医院(湖北医药学院附属人民医院)儿童医疗中心(邮编 442000)2.玉溪市疾病预防控制中心3.湖北医药学院基础医学院病原生物学教研室4.十堰市人民医院(湖北医药学院附属人民医院)儿童医疗中心(邮编 442000);湖北医药学院基础医学院病原生物学教研室
摘要：目的 阐明新型冠状病毒(SARS-CoV-2)B.1.1.7变异株核衣壳蛋白(N蛋白)特异性突变体(ND3L、NM234I和NR203K-G204R-T205I)与新型冠状病毒感染(COVID-19)患者临床状态的相关性,揭示其对N蛋白液-液相分离(LLPS)现象和宿主天然免疫应答的影响.方法 基于全球共享流感数据倡议组织(GISAID)数据库的SARS-CoV-2 B.1.1.7谱系全基因组测序数据,筛选与轻/重症临床表型显著相关的非同义突变位点.针对高频N蛋白突变体,采用双荧光素酶报告系统定量检测干扰素(IFN)-β启动子转录活性;qPCR检测IFN-β、白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α mRNA表达水平;通过激光共聚焦显微观察LLPS特征.蛋白印迹检测宿主线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)的泛素化修饰状态.结果 共鉴定出17 640个非同义突变位点,其中突变频率>1%且有65个与轻症相关,20个与重症相关.与重症相关的N蛋白突变位点为D3L、M234I、R203K-G204R-T205I.N蛋白及NM234I、NR203K-G204R-T205I突变体均可抑制IFN-β的启动子活性(P＜0.05).相较于野生型N,NR203K-G204R-T205I突变体可显著降低IFN-β、IL-6和TNF-α mRNA水平(P＜0.05),同时可通过分散LLPS凝聚点的形成而改变相分离状态.但N突变体不影响宿主MAVS的泛素化修饰.结论 SARS-CoV-2 B.1.1.7变异株N蛋白突变体可通过改变LLPS状态抑制天然免疫应答,进而影响COVID-19患者的临床预后.
关键词：新型冠状病毒冠状病毒核壳蛋白质类干扰素β临床状态B.1.1.7谱系液-液相分离
分类号：R373.1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
资助基金：国家自然科学基金(82002149)湖北省医学领军人才培养工程(2024-2027)十堰市科技领军人才扶持计划(2023)
论文发表日期：2025-12-15
在线出版日期：2025-12-17（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1240-1245 )
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