DOI: 10.12307/2026.246
miR-9调控小鼠大脑皮质神经干细胞的分化
刘颖赵1
马艳霞2
林耀发1
张国桥1
苗炜亮1
贾燕丽1
池宸申1
宋旺胜1
李迪3
刘成龙4
张浩楠1
1.上海市第一人民医院嘉定医院(上海市嘉定区江桥医院),上海市 2018032.苏州大学骨科研究所,江苏省 苏州市 2150063.苏州大学附属第一医院神经外科,江苏省 苏州市 2150004.高邮市人民医院麻醉科,江苏省高邮市 225600
摘要：背景:位于脑室区和脑室下区的神经干细胞对大脑皮质的神经发育及神经退行性疾病的治疗至关重要,但具体调控机制尚未完全阐明.miRNA-9(miR-9)是脊椎动物早期及成年大脑中表达最丰富的miRNAs之一,在发育过程中具有多种功能,然而miR-9在神经干细胞分化中的作用尚不清楚.
目的:探讨miR-9在调控脑室区和脑室下区神经干细胞分化中的作用.
方法:分离胚胎14.5 d ICR小鼠脑室区和脑室下区神经干细胞,采用原代培养技术在增殖培养基中培养三四天形成神经球后,通过Pax6/Nestin免疫荧光双染鉴定细胞干性.采用qRT-PCR检测胚胎12.5,14.5,16.5,18.5 d和出生后0,7 d不同发育阶段端脑组织以及胚胎14.5 d体外培养神经干细胞中miR-9的表达谱.使用转染试剂miR-9抑制剂和模拟物对神经干细胞进行转染,转染24 h后继续分化三四天(神经元)和6-8 d(胶质细胞),通过Tuj1(神经元标志物)、髓鞘碱性蛋白(少突胶质细胞标志物)和胶质纤维酸性蛋白(星形胶质细胞标志物)免疫荧光染色定量各谱系分化情况.
结果与结论:qRT-PCR结果显示,miR-9在胚胎早期(胚胎12.5 d-14.5 d)端脑组织中呈现高表达,随发育进程(胚胎16.5 d至出生后7 d)表达量逐渐降低.胚胎14.5 d神经干细胞中miR-9表达水平接近内参RNU6B表达水平的90%.功能实验表明,与对照组相比,miR-9抑制组Tuj1阳性神经元和髓鞘碱性蛋白阳性少突胶质细胞比例降低,而胶质纤维酸性蛋白阳性星形胶质细胞比例升高.相反,miR-9过表达组Tuj1阳性神经元和髓鞘碱性蛋白阳性少突胶质细胞比例升高,胶质纤维酸性蛋白阳性星形胶质细胞比例降低,差异均有显著性意义(P<0.001).结果表明,miR-9在神经干细胞分化中呈现双向调控作用:①通过发育阶段特异性表达模式(早期高表达,后期下调)参与神经发生时序调控;②通过促进神经干细胞向神经元和少突胶质细胞分化、同时抑制星形胶质细胞生成来维持三系分化平衡.
关键词：miR-9神经干细胞分化神经元少突胶质细胞星形胶质细胞
分类号：R459.9(治疗学)R329.2(人体形态学)Q421(神经生理学)
论文发表日期：2026-07-08
在线出版日期：2026-03-27（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 4942-4948 )
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