小鼠釉丛蛋白在大肠杆菌中的表达,纯化及抗血清的制备
朱庆林1
吴补领1
顾淑萍1
张莹1
相顺利2
费俭3
1.第四军医大学口腔医学院,陕西,西安7100322.咸阳市口腔医院,陕西,咸阳,7120003.中科院上海生化细胞所,上海,200031
摘要：目的:以大肠杆菌为工程菌制备釉丛蛋白,纯化并免疫制备抗血清.方法:用酶切、连接的方法将已克隆至pBluescript KS+载体中的Tuftelin cDNA片段(编码365个氨基酸)用T4 DNA连接酶连入载体pPRoEXTMHTc中,转化大肠杆菌,IPTG 诱导.收集菌体,裂解后SDS-PAGE 电泳,表达出分子量Mr 42×103的融合蛋白.割胶后免疫新西兰大白兔,制备抗体.结果:表达出分子量Mr 42×103的融合蛋白与预期一致.8周以后,Western检测抗原抗体特异性及抗体效价达1:100 000.结论:认为成功的表达出釉丛蛋白并制备出了高效价多克隆抗体.
关键词：釉丛蛋白大肠杆菌融合蛋白原核表达聚丙烯酰胺凝胶电泳
分类号：R780.2(口腔病理学)
论文发表日期：2002-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：3( 235-237 )
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