H3K18乳酸化修饰参与低氧诱导脑微血管内皮细胞泛凋亡发生
郑明泽1
李鸣2
官瑞丽3
刘新秦3
1.空军军医大学基础医学院学员一大队,陕西西安 7100322.解放军95876部队医院,甘肃张掖 7341003.空军军医大学军事预防医学系军队劳动与环境卫生学教研室,特殊作业环境危害评估与防治教育部重点实验室,陕西西安 710032
摘要：目的 探究乳酸化修饰参与低氧诱导脑微血管内皮细胞泛凋亡发生的作用机制.方法 选择20只雄性8周龄C57BL/6小鼠,建立模拟海拔6 000 m低氧环境暴露28 d动物模型.20只小鼠随机分为常氧组、低氧组(每组10只).体外构建bEnd.3细胞系常氧(210 mL/L O2)和低氧(10mL/L O2)环境24 h暴露模型.对小鼠海马组织进行CD31、GSDMD免疫荧光标记;透射电镜观察小鼠海马组织脑微血管内皮细胞超微结构改变;利用qRT-PCR方法检测海马组织及bEnd.3细胞ZBP1、NLRP3、NLRP12、ASC、CASP4、GSDMD等泛凋亡相关分子表达情况;Western blotting检测海马组织及bEnd.3细胞GSDMD蛋白表达和Pan-Kla、H3K18乳酸化修饰(H3K18la)水平.用乳酸试剂盒检测海马组织和bEnd.3细胞L-乳酸(L-LA)含量,用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定外周血和bEnd.3细胞LDH释放量;进一步使用草氨酸钠(OXA)抑制bEnd.3细胞乳酸代谢后检测L-LA、LDH及上述泛凋亡分子表达水平.结果 免疫荧光染色结果提示低氧组较常氧组海马组织CD31+GSDMD+细胞数增多,透射电镜可见低氧组海马脑微血管出现特征性焦亡内皮细胞;低氧组小鼠外周血和海马组织乳酸(P＜0.01)和 LDH(P＜0.01)含量升高;qRT-PCR 检测发现海马组织 ZBP1(P＜0.01)、NLRP3(P＜0.01)、NLRP12(P＜0.01)、ASC(P＜0.01)、CASP4(P＜0.01)、GSDMD(P＜0.01)表达水平低氧组较常氧组显著升高.Western blotting检测海马组织Pan-Kla(P＜0.01)、H3K18la(P＜0.01)表达水平低氧组较常氧组升高;与常氧组相比,低氧24 h组较常氧24 h组bEnd.3细胞GSDMD蛋白表达增加且Pan-Kla(P＜0.01)、H3K18la(P＜0.01)水平升高,乳酸(P＜0.01)和LDH(P＜0.01)含量较常氧组升高;低氧+OXA组与低氧组bEnd.3细胞相比,乳酸含量(P＜0.05)和LDH释放量(P＜0.05)减少,损伤相对减弱,上述泛凋亡分子表达水平降低(P＜0.05).结论 低氧暴露可诱导脑微血管内皮细胞泛凋亡的发生,H3K18la可为参与低氧诱导脑微血管内皮细胞泛凋亡的重要靶点.
关键词：低氧认知障碍神经炎症脑微血管内皮细胞泛凋亡蛋白质乳酸化
分类号：R338(人体生理学)
资助基金：国家自然科学基金(82230063)
论文发表日期：2025-05-31
在线出版日期：2026-08-26（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 583-590 )
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