注射用美珀珠单抗关键质量属性的全面表征
杨天一
宋培明
郭晓冰
陈小春
唐浩
江苏太平洋美诺克生物药业股份有限公司,江苏常州 213000
摘要：目的 全面表征注射用美珀珠单抗的一级结构、翻译后修饰、二硫键连接方式、纯度、高级结构及Fc段功能等关键质量属性,为其质量控制与临床应用提供依据.方法 采用超高效液相色谱-质谱联用测定完整分子量、肽图覆盖率、翻译后修饰及二硫键连接方式;采用亲水相互作用色谱-荧光检测-质谱联用分析N-糖型;采用尺寸排阻色谱(SEC)、毛细管电泳(CE-SDS)及分析型超速离心(AUC)评估纯度与聚集状态;采用圆二色谱分析二级结构;采用差示扫描量热法(DSC)测定热稳定性;采用表面等离子共振(SPR)技术测定Fc段与C1q、Fcγ受体及FcRn的亲和力.结果 美珀珠单抗完整分子量实测值与理论值一致,氨基酸序列覆盖率达100％.翻译后修饰分析显示,重链C端赖氨酸缺失比例为99.7％,Fc区甲硫氨酸M274氧化比例为11.9％,重链互补决定区附近天冬氨酸D102异构化比例为18.1％.共鉴定出18对二硫键,连接方式符合IgG2亚型特征.N-糖型以GOF、G1F和G2F为主.SEC与CE-SDS测得单体纯度＞99.5％,AUC在天然状态下测得单体比例为95.5％.二级结构以β-折叠为主,DSC显示3个特征熔融温度.SPR分析表明,美珀珠单抗与FcRn具有高亲和力(KD=3.35×10-8mol/L).结论 系统阐明了美珀珠单抗的关键质量特征,确证其一级结构与高级结构的正确性,并鉴定出M274氧化与D102异构化为需重点监控的潜在关键质量属性.研究结果为其质量控制标准建立及临床转化提供了关键理化依据,同时为IgG2亚型抗体药物的深度表征积累了研究经验.
关键词：单克隆抗体美珀珠单抗IgG2型质量表征翻译后修饰二硫键糖基化关键质量属性
分类号：R914(药物基础科学)O657.63(分析化学)
资助基金：临港国家实验室科研任务项目(LGL-2612-11)
论文发表日期：2026-07-31
在线出版日期：2026-08-26（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 969-977 )
英文信息