ANG-1基因重组腺病毒载体的构建及其转染骨髓间充质干细胞的实验研究
刘君
徐皓
陈建梅
姚晓东
1.福建医科大学福总临床医学院骨一科,福州,3500252.福建医科大学福总临床医学院骨一科,福州,3500253.福建医科大学福总临床医学院骨一科,福州,3500254.福建医科大学福总临床医学院骨一科,福州,350025
摘要：目的 构建携带大鼠血管生成素-1 (angiopoietin-1,ANG-1)基因的重组腺病毒载体,并检测其转染对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)活力的影响.方法 RT-PCR法获取大鼠ANG-1基因并亚克隆至穿梭质粒pAdTraek-CMV,经测序无误后与骨架质粒pAdEasy-1在BJ5183中同源重组.重组质粒pAdEasy- 1-ANG-1经鉴定后转染293细胞进行病毒包装扩增.体外转染BMSCs,检测转染后BMSCs中ANG-1的表达.MTT法评估常氧及缺氧环境下ANG-1对BMSCs的影响.结果 重组腺病毒载体pAdEasy- 1-ANG-1经测序及酶切鉴定正确；BMSCs经转染ANG-1基因后表达ANG-1.MTT法检测提示常氧及缺氧条件下转染前后BMSCs活性的差异均无统计学意义(缺氧组与缺氧下转染组相比,P＞0.05;常氧组与常氧下转染组相比,P ＞0.05).结论 成功构建大鼠ANG-1基因重组腺病毒载体,且其转染在体外不影响BMSCs的活性.
关键词：血管生成素-1腺病毒科遗传载体重组遗传转染骨髓间充质干细胞
分类号：R394(医学遗传学)R329.2(人体形态学)
资助基金：福建省青年人才基金(2007F3079)
论文发表日期：2011-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 199-206 )
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