黄芪多糖通过Nrf2/Keap1信号通路调控脂多糖诱导小鼠肺泡巨噬细胞有氧糖酵解和铁死亡
薛祥1
孙兆瑞2
聂时南3
1.210000 江苏南京,南京大学医学院附属金陵医院急诊医学科2.210002 江苏南京,中国人民解放军南京总医院急诊科3.210002 江苏南京,东部战区总医院急诊医学科
摘要：目的 探索黄芪多糖(APS)对脂多糖(LPS)诱导小鼠肺泡巨噬细胞(MHS)有氧糖酵解和铁死亡的影响和调控机制.方法 用LPS诱导离体肺泡巨噬细胞系构建急性肺损伤细胞模型,分为对照组、LPS组、Bardoxolone+LPS组、APS+LPS组和ML385+APS+LPS组.用酶联免疫吸附实验(ELISA)、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质免疫印记法(Western blot)分别检测各组细胞炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、氧化应激损伤指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)]、有氧糖酵解指标[乳酸脱氢酶(LDH)、果糖-2,6-二磷酸酶3(PFKFB3)、丙酮酸激酶2(PKM2)、己糖激酶2(HK2)]和铁死亡指标[长链酰基辅酶A合成酶4(ACSL4)、胱氨酸/谷氨酸反向转运蛋白(xCT)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)]以及Nrf2/Keap1信号通路关键蛋白(细胞核Nrf2、细胞质Nrf2、Keap1)表达变化.结果 与对照组比较,LPS组IL-6、IL-1β、TNF-α表达水平升高,MDA、ROS水平升高,SOD水平下降;LDH、PFKFB3、PKM2、HK2、ACSL4在mRNA和蛋白表达水平升高,xCT、GPX4表达下降;细胞核Nrf2、Keap1表达减少.与LPS组比较,APS+LPS组IL-6、IL-1β、TNF-α表达水平下降,MDA、ROS 水平下降,SOD升高;LDH、PFKFB3、PKM2、HK2、ACSL4表达水平下降,xCT、GPX4表达升高;细胞核Nrf2、Keap1表达升高.Nrf2激活剂Bardoxolone可以部分逆转LPS组的代谢重编程和铁死亡,而APS+LPS组的治疗效果可以被Nrf2抑制剂ML385所抑制.结论 APS可以激活Nrf2/Keap1信号通路,抑制LPS诱导的肺泡巨噬细胞有氧糖酵解和铁死亡,缓解肺泡巨噬细胞损伤.
关键词：黄芪多糖有氧糖酵解铁死亡肺泡巨噬细胞Nrf2/Keap1信号通路
资助基金：江苏省自然科学基金面上项目(BK20211136)
论文发表日期：2025-08-10
在线出版日期：2025-09-10（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 694-702 )
英文信息