海藻糖仿生纳米囊泡的制备及其对缺氧诱导的心肌细胞损伤的保护作用
吕园园1
赵智寒2
谷政慧3
钟光辉2
1.430000 湖北省武汉市,中部战区总医院汉口医疗区内科2.中部战区总医院第一派驻门诊部3.联勤保障部队第九二一医院心内科
摘要：目的 构建海藻糖仿生纳米囊泡(Tre NVs),以探索心肌缺血损伤后的治疗新策略,观察其物理性质和化学性质,探究其保护心肌细胞因缺氧引起的损伤.方法 采用微型过滤器连续挤出骨髓间充质干细胞提取纳米囊泡(nanovesicles,NVs),通过超声法制备负载海藻糖(trehalose,Tre)的Tre NVs.对Tre NVs的粒径、电位、形态和细胞毒性等均进行表征观察,验证Tre NVs理化性质,通过流式细胞术、荧光染色等观察Tre NVs对缺氧诱导的心肌细胞损伤的保护作用.结果 成功制备Tre NVs,Tre NVs表现出与典型细胞外囊泡相似的形态,呈具备双层膜结构的茶托状囊泡,且Tre NVs的粒径集中为(133.9±1.27)nm,电位为(-47.1±2.23)mV.高效液相色谱(HPLC)分析囊泡负载Tre效率测定为(40.42±0.85)%.此外,CCK-8实验检测出Tre NVs浓度的增加并未显著影响与之共培养的心肌细胞活性,心肌细胞的存活率均保持在85%左右.通过激光共聚焦显微镜观察到DiI红色荧光染料标记的Tre NVs能够被H9C2细胞摄取并散在分布于心肌细胞核周围.在体外模拟心肌缺血条件下,心肌细胞仍能够有效摄取Tre NVs,且通过流式细胞仪检测Tre NVs处理后,体外模拟心肌缺血条件下心肌细胞的凋亡情况明显减少.利用DCFH-DA活性氧(ROS)检测试剂盒检测ROS生成情况,可以观察到Tre NVs给药后,缺氧诱导的心肌细胞其ROS的生成水平均显著降低.结论 Tre NVs的仿生递送系统能够装载海藻糖,提高Tre的生物利用度.Tre NVs能够改善心肌缺血损伤后的高活性氧环境,对缺氧诱导的心肌细胞损伤具有保护作用.
关键词：海藻糖纳米囊泡活性氧心肌缺血
分类号：R54(心脏、血管（循环系）疾病)
论文发表日期：2025-11-20
在线出版日期：2025-12-05（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1045-1050 )
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