NET-1通过调控NF-κB/β-catenin信号通路促进心肌缺血再灌注损伤中细胞凋亡的分子机制
李佳欣1
郑伟2
宋明星2
宋秀荣2
李洪宇2
李猛3
1.包头医学院中心临床医学院,内蒙古 包头 014040;包头市中心医院心内科,内蒙古 包头 0140422.包头市中心医院心内科,内蒙古 包头 0140423.包头市中心医院介入科,内蒙古 包头 014042
摘要：目的 阐明神经上皮转化因子1(NET-1)通过调控NF-κB/β-catenin信号通路促进心肌缺血再灌注损伤(MIRI)中细胞凋亡的分子机制.方法 通过缺氧/复氧处理在体外构建了H9C2细胞缺血再灌注损伤模型.实验设计分为两部分:(1)缺氧时间梯度实验(0、2、4、6、8、12 h)并结合基因过表达/敲除技术,检测细胞凋亡与NET-1表达相关性;(2)机制研究:通过蛋白质免疫共沉淀(Co-IP)验证NET-1与NF-κB、NF-κB与β-catenin的互作.结合基因过表达/敲除技术,采用Western blot和RT-qPCR分析下游靶基因表达.结果 (1)心肌细胞凋亡与缺氧时长及NET-1表达呈正相关(6 h达峰值);过表达NET-1显著加剧细胞凋亡,而敲低NET-1则显著抑制凋亡.随着缺氧时间越长,NET-1、Caspase-3、Bax的蛋白和mRNA表达显著增加,到6 h达高峰;在过表达NET-1组Caspase-3、Bax的蛋白和mRNA表达显著增加,而敲减 NET-1 组则显著减少.(2)NF-κB 在缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡中起促进作用,可与NET-1相互作用并受到NET-1的调控.NF-κB 表达水平与Caspase-3、Bax的蛋白和mRNA表达呈正相关.在过表达NET-1组NF-κB的表达显著增加,而在敲减NET-1组则显著减少.CO-IP显示NET-1可与NF-κB免疫共沉淀.(3)β-catenin 在缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡中起促进作用,可与NF-κB 相互作用并受到NF-κB的调控.β-catenin 表达水平与Caspase-3、Bax的蛋白和mRNA表达呈正相关.在过表达NF-κB组β-catenin表达显著增加,而在敲减NF-κB组则显著减少.CO-IP显示NF-κB可以与β-catenin免疫共沉淀.结论 NET-1正向调控NF-κB并激活β-catenin,协同促进MIRI相关心肌细胞凋亡.靶向抑制NET-1显著减轻细胞凋亡,提示其作为新型治疗靶点的潜在价值.
关键词：神经上皮转化因子1缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡核转录因子-κBβ-catenin
资助基金：内蒙古自治区自然科学基金项目(2022MS08047)内蒙古自治区卫生健康科技计划项目(202201512)
论文发表日期：2026-02-20
在线出版日期：2026-03-19（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 210-216 )
英文信息