一种简便、快速、高效适合PCR的真菌DNA提取方法
柴海云1
张磊1
袁牧歌2
朱庆义1
1.广州金域医学检验中心微生物室,广州,5100052.广州医科大学金域检验学院,广州,511436
摘要：目的 探索一种新的真菌DNA提取方法,该方法操作简便,提取效率高,耗时较短,应用范围广.方法 将酶消化和Chelex-100提取DNA方法联合起来,配制一种新的DNA提取试剂.通过真菌ITS4和ITS5通用引物进行PCR,对新的DNA提取试剂同市售的Takara lysis buffer在DNA提取方面的效能进行评价,同时对DNA浓度和纯度进行测定.结果 实验所用34株真菌,自配试剂成功提取出32株真菌DNA;Takara lysis buffer成功提出27株真菌DNA.对于两种方法都没能提出DNA的2株真菌,经液氮研磨破壁后,自制试剂均成功提取;而Takara lysis buffer仅成功提取DNA 1株.结论 同市售试剂Takara lysis buffer比较,自配DNA提取液提取DNA质量相对较高,可用于临床常见感染真菌的PCR诊断.对于某些真菌,提取DNA之前先进行菌体破壁是必要的.
关键词：蛋白酶K蜗牛酶Chelex-100DNA提取
分类号：R379(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)R446.5(诊断学)
论文发表日期：2017-01-01
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：4( 359-361,367 )
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