白念珠菌SHO1基因敲除株的构建及鉴定
贾克然
秦立霞
郑洁
李玮
李芳
赵会海
联勤保障部队第九八〇医院检验科,石家庄 050082
摘要：目的 真菌的细胞膜上普遍存在高渗透压信号蛋白 1(high osmolarity signaling protein 1,Sho1),其结构相对保守,在致病机制中发挥重要作用.然而,Sho1 蛋白对白念珠菌致病能力的影响尚未见报道.因此,建立构建白念珠菌SHO1 基因敲除株的方法,为后续深入探索Sho1 蛋白对白念珠菌生物学性状及致病能力的影响提供了理论基础.方法 基因敲除技术选择采用SN152(His-/Leu-/Arg-)缺陷株为亲本株,运用融合PCR技术和同源互补的His和Leu质粒,目的基因可以被快速有效地敲除.通过结晶紫染色实验观察生物膜形成能力、聚苯乙烯孔板模型检测其黏附能力、革兰染色油镜观察菌丝形态,初步探索了Sho1 蛋白对白念珠菌致病能力的影响.结果 构建了his和融合PCR-his基因敲除盒,leu和融合PCR-leu基因敲除盒并将它们电转化到SN152 中,用缺陷培养基筛选敲除株.通过PCR、琼脂糖凝胶电泳和基因测序方法验证SHO1 基因敲除株.实验结果提示敲除SHO1 基因后会导致生物膜的形成能力下降.结论 成功构建了白念珠菌SHO1 基因敲除株,SHO1 基因的敲除使白念珠菌的生物膜生成能力降低,致病力下降.
关键词：白念珠菌基因敲除Sho1PCR
资助基金：河北省医学科学研究课题(20250189)
论文发表日期：2026-02-28
在线出版日期：2026-03-19（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 52-57 )
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