紫堇醇灵碱通过调节巨噬细胞极化改善骨髓间充质干细胞成骨性能分析
李柔1
李婧2
郭燕宁2
张凯2
许世清3
景亚楠2
曹聪2
何晓彤2
徐宝华4
1.中日友好医院(中日友好临床医学研究所),北京 100029;中国医学科学院北京协和医学院,北京 1007302.中日友好医院口腔医学中心,北京 1000293.中日友好医院(中日友好临床医学研究所),北京 1000294.中国医学科学院北京协和医学院,北京 100730;中日友好医院口腔医学中心,北京 100029
摘要：目的 探讨紫堇醇灵碱是否通过调节巨噬细胞极化改善骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchyml stem cell,BMSC)迁移、成骨分化.方法 CCK-8选取紫堇醇灵碱最佳实验浓度,采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导RAW264.7向 M1型极化,设置对照组(0 μmol/L)和低、中、高浓度实验组(1、4、8 μmol/L),加入相应紫堇醇灵碱,通过流式、免疫荧光、实时荧光定量 PCR 及Western blot测定炎症相关指标的表达,活性氧(reactive oxygen,ROS)实验检测ROS含量变化.设置划痕-对照组、划痕-Cor组、划痕-LPS组、划痕-LPS+Cor组进行细胞划痕实验,观察各组细胞迁移情况;设置成骨-对照组、成骨-Cor组、成骨-LPS组、成骨-LPS+Cor组进行成骨分化检测,观察碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)含量.结果 流式细胞检测和免疫荧光检测显示,对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组CD86表达逐渐降低,CD206表达逐渐升高.qRT-PCR检测和Western blot检测显示,对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组M1相关基因肿瘤坏死因子α、白细胞介素1表达逐渐下调,M2相关基因精氨酸酶1、白细胞介素10表达逐渐上调;且与对照组比较,高浓度组M1下调和M2上调变化最显著(P<0.01).ROS实验显示,低浓度组、中浓度组、高浓度组细胞内DCFH-DA荧光强度逐渐下降,高浓度组下降最显著(P<0.001).细胞划痕实验显示,划痕-LPS+Cor组、划痕-LPS组、划痕-Cor组、划痕-对照组细胞迁移率依次降低.ALP染色及定量分析显示,成骨培养14 d时,成骨-LPS+Cor组ALP活性明显高于成骨-LPS组、成骨-Cor组、成骨-对照组(P<0.001).结论 高浓度(8 μmol/L)的紫堇醇灵碱能有效抑制RAW264.7向M1型转化,促进RAW264.7向M2型转化,并且其在介导RAW264.7极化促进BMSC迁移、成骨分化效果显著,为进一步研究紫堇醇灵碱的抗炎机制及治疗骨损伤相关疾病提供了一个新的思路.
关键词：紫堇醇灵碱炎症巨噬细胞极化骨髓间充质干细胞成骨分化
资助基金：中央高水平医院临床科研业务费资助(2025-NHLHCRF-PY-22)
论文发表日期：2025-11-20
在线出版日期：2025-12-02（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 406-412 )
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