微小RNA-423-5p靶向调控谷胱甘肽S转移酶mu 1在亚低温减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用
刘锦浩1
孙艳1
朱慧杰2
孙雪华3
董瑞1
袁阳1
张高峰1
1.青岛市市立医院麻醉科,山东 青岛 2660712.中山大学第七附属医院麻醉科,广东 深圳 5180003.滨州医学院烟台附属医院疼痛科,山东 烟台 264000
摘要：目的 评价微小RNA(microRNA,miRNA)-423-5p靶向调控谷胱甘肽S转移酶 mu 1(glutathione S-transferase mu 1,GSTM1)在亚低温减轻大鼠脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)中的作用.方法 选取100只8周龄SD大鼠,随机分为5组:假手术组、脑缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)组、亚低温组、miR-423-5p激动剂+亚低温(miR-423-5p agonist+mild hypothermia,AGH)组、miR-423-5p阴性对照+亚低温(miR-423-5p negative control+mild hypothermia,NCH)组,每组20只.IR组采用线栓法建立CIRI模型;假手术组仅分离血管不阻断;亚低温组在再灌注时用75%乙醇溶液擦拭大鼠头部及颈部维持脑温32～33℃3 h;AGH组和NCH组于造模前2 d侧脑室注射miR-423-5p激动剂或对照剂.再灌注24 h后行改良神经功能缺损评分(modified neurological severity score,mNSS),取脑组织缺血半暗区脑皮质检测GSTM1、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、精氨酸酶1(arginase-1,Arg-1)蛋白表达、GSTM1 mRNA及miR-423-5p表达、神经细胞凋亡率和形态学变化.体外实验用双荧光素酶报告基因检测miR-423-5p与GSTM1的靶向关系.结果 与假手术组比较,IR组、亚低温组、AGH组、NCH组的iNOS、Arg-1、miR-423-5p表达、mNSS、细胞凋亡率显著升高,GSTM1、GSTM1 mRNA表达显著降低(P<0.05);与IR组比较,亚低温组iNOS(1.75±0.44 vs 4.06±1.08)、miR-423-5p表达(1.83±0.21 vs 3.48±0.36)、mNSS[(4.05±1.15)分vs(10.25±2.0)分]和细胞凋亡率[(19.56±1.51)%vs(59.90±2.31)%]显著降低(P<0.05),Arg-1(15.30±4.05 vs 6.27±1.74)、GSTM1(0.60±0.07 vs 0.26±0.04)、GSTM1 mRNA表达(0.72±0.07 vs 0.45±0.08)显著升高(P<0.05);与亚低温组比较,AGH组iNOS、miR-423-5p表达、mNSS和细胞凋亡率显著增高,Arg-1、GSTM1、GSTM1 mRNA表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).苏木精-伊红染色显示,IR组见大量细胞损伤,亚低温组细胞损伤减轻,AGH组保护作用减弱.双荧光素酶实验报告结果显示,miR-423-5p靶向结合GSTM1.结论 亚低温可能通过下调miR-423-5p表达,上调GSTM1表达,促进小胶质细胞由M1向M2表型极化,减轻CIRI.
关键词：低温人工再灌注损伤脑谷胱甘肽转移酶
资助基金：青岛市医疗卫生优秀人才培养项目(2025-2027-10)青岛市市南区科技计划项目(2023-2-012-YY)青岛市市南区科技计划项目(2023-2-013-YY)青岛市科技惠民示范专项(25-1-5-smjk-16-nsh)
论文发表日期：2026-02-15
在线出版日期：2026-03-11（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 250-255 )
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