RNA结合蛋白ELAVL1依赖m6A调控SOX4稳定性促进激素敏感型前列腺癌增殖
闵莎莎
蔡忠林
沈彦婷
王忠
上海理工大学公利医院医疗技术学院,上海 200093;上海市浦东新区公利医院泌尿外科男科学部,上海 200135
摘要：目的:探讨RNA结合蛋白ELAVL1在前列腺癌(PCa)组织,特别是激素敏感型前列腺癌(HSPC)组织中的表达及其与肿瘤增殖的关系,揭示ELAVL1通过m6A修饰介导SOX4 mRNA稳定性,促进HSPC增殖的分子机制.方法:在癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析ELAVL1在PCa组织中的表达及其与预后的关系,并比较其在HSPC和激素抵抗型前列腺癌(HRPC)组织中的差异.通过Western印迹检测ELAVL1在PCa细胞系中的蛋白表达,siRNA敲低ELAVL1后通过CCK-8评估其对细胞增殖的影响,并用RT-qPCR检测下游靶基因的变化.裸鼠成瘤实验进一步验证ELAVL1对肿瘤生长的影响.接着通过RIP-seq鉴定ELAVL1与SOX4 mRNA的互作关系,RT-qPCR和Western印迹分别检测siRNA敲低ELAVL1后SOX4 mRNA和蛋白水平.CCK-8用于评估敲低SOX4对细胞增殖的影响.MeRIP-qPCR用于检测SOX4的m6A修饰水平及敲低METTL3的影响,RNA pull-down实验验证SOX4 RNA片段与ELAVL1蛋白的互作,RNA稳定性实验评估ELAVL1敲低对SOX4 mRNA稳定性的影响.结果:ELAVL1在PCa细胞中的表达高于前列腺正常上皮细胞.ELAVL1高表达的患者预后明显差于低表达的患者,GSE32269数据库中HSPC组织中的ELAVL1表达水平显著高于HRPC.在人PCa细胞LNCaP和VCaP中敲低ELAVL1后,细胞增殖能力受到影响,而过表达ELAVL1会促进HSPC细胞的增殖.体内研究显示敲低ELAVL1后,LNCaP移植瘤的生长受到明显抑制,移植瘤的质量明显降低.在LNCaP和VCaP细胞中SOX4 mRNA和蛋白水平均显著高于前列腺正常上皮细胞RWPE-1.RIP-qPCR证实ELAVL1蛋白与SOX4 mRNA存在互作关系.在敲低ELAVL1后,SOX4 mRNA和蛋白表达水平均显著下降;敲低SOX4后,LNCaP和VCaP细胞的增殖能力受到显著抑制.HSPC细胞中ELAVL1依赖m6A调控了 SOX4的RNA稳定性.结论:ELAVL1高表达于HSPC组织中.高表达的ELAVL1与HSPC细胞的增殖有关.SOX4是ELAVL1的下游分子,促进HSPC细胞的增殖;ELAVL1依赖m6A促进SOX4 mRNA促进SOX4 mRNA的稳定性.
关键词：激素敏感型前列腺癌ELAVL1SOX4前列腺癌增殖m6A
分类号：R737.25(泌尿生殖器肿瘤)
论文发表日期：2025-09-20
在线出版日期：2025-11-10（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 791-799 )
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