Keap1-Nrf2信号通路对体外蛛网膜下腔出血细胞模型炎症反应的调控作用研究
玉石1
黑悦2
伍苛夫1
龙乾发3
刘卫平4
1.解放军联勤保障部队第九二三医院神经外科,南宁 5300002.空军军医大学西京医院肿瘤科,西安 7100323.西安市中心医院神经外科,西安 7100004.西北大学附属西安市人民医院神经外科,西安 710000
摘要：目的 探讨Keap1-Nrf2通路在体外蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)细胞模型中调控炎症反应的机制.方法 采用25 μM氧合血红蛋白(oxyhemoglobin,OxyHb)处理神经元-小胶质细胞共培养体系24 h建立SAH模型,分为Control组、OxyHb组、OxyHb+sh-Keap1组(短发夹RNA干扰Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1,small hairpin RNA Kelch-1ike ECH-associated protein l,sh-Keap1)、OxyHb+sh-NC组(small hairpin RNA Negative Contros,sh-NC).检测细胞增殖、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α、白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)、转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)水平;检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)变化、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平;检测Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelch-1ike ECH-associated protein l,Keap1)、红系衍生的核因子2相关因子2(Nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、重链结合蛋白(heavy-chain binding protein,BIP)、肌醇需要酶1α(Inositol-requiring enzyme 1 α,IRE1α)、蛋白激酶RNA样内质网激酶(protein kinase RNA-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)、磷酸化蛋白激酶RNA样内质网激酶(phospho-protein kinase RNA-like endoplasmic reticulum kinase,p-PERK)、激活转录因子6(activating transcription factor 6,ATF6)表达;检测M1型小胶质细胞表面标志物诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和M2型小胶质细胞表面标志物精氨酸酶1(arginase-1,Arg1)表达.结果 与对照组相比,氧合血红蛋白组细胞活力显著降低(P<0.05),氧化应激和炎症反应加剧.敲低Keap1可激活Nrf2通路,减轻氧化应激和炎症反应(P<0.05)并显著提高细胞活力(P<0.05).相比氧合血红蛋白组,氧合血红蛋白+敲低Keap1载体组小胶质细胞向M2型极化显著增加(P<0.05).结论 Keap1-Nrf2通路通过调控内质网氧化应激及小胶质细胞极化调控SAH炎症反应,可为治疗提供新靶点和方向.
关键词：Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1红系衍生的核因子2相关因子2体外蛛网膜下腔出血模拟细胞模型内质网应激小胶质细胞极化
资助基金：国家自然科学基金(82301553)
论文发表日期：2025-12-28
在线出版日期：2025-12-02（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 21-27 )
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