基于氧化应激途径探讨CTHRC1促进病理性心肌重构的机制研究
李楠1
付贺青1
初士棋1
张姝2
聂慧娟2
董玉3
刘天龙1
1.内蒙古医科大学附属医院 呼和浩特 010059;内蒙古医科大学 呼和浩特 0101102.内蒙古医科大学附属医院 呼和浩特 0100593.内蒙古医科大学 呼和浩特 010110
摘要：目的:观察体外过表达胶原三螺旋重复蛋白1(CTHRC1)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的病理性心肌重构的影响及相关机制.方法:将体外培养大鼠H9c2心肌细胞分为GFP组(转染阴性对照GFP-AAV9型基因腺病毒4.8×1010 PFU/mL)及CTHRC1组(转染CTHRC1-AAV9型基因腺病毒2.4×1010 PFU/mL).再将GFP组分为Vehicle-GFP组(转染阴性对照GFP-AAV9型基因腺病毒4.8×1010 PFU/mL)和GFP-AngⅡ组(转染阴性对照GFP-AAV9型基因腺病毒4.8×1010 PFU/mL,AngⅡ 10 μmol/L);将CTHRC1组分为Vehicle-CTHRC1组(转染CTHRC1-AAV9型基因腺病毒2.4×1010 PFU/mL)、CTHRC1-AngⅡ组(转染CTHRC1-AAV9型基因腺病毒2.4×1010 PFU/mL,AngⅡ 10 μmol/L).采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测CTHRC1蛋白表达;鬼笔环肽染色评价H9c2细胞表面积.10%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后对凝胶进行考马斯亮蓝染色,切胶并利用高分辨率质谱进行蛋白鉴定,对差异基因进行基因本体(GO)、基因集富集分析(GSEA)功能富集分析.试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及丙二醛(MDA)活性.结果:与Vehicle-GFP组比较,GFP-AngⅡ组H9c2细胞表面积增大(P＜0.001);与Vehicle-CTHRC1组比较,CTHRC1-AngⅡ组H9c2细胞表面积增大(P＜0.001);与GFP-AngⅡ组比较,CTHRC1-AngⅡ组比较H9c2细胞表面积增大(P＜0.001).与Vehicle组比较,AngⅡ组H9c2细胞表达水平在75 kDa附近降低.与GFP组比较,CTHRC1组有31个蛋白显著下调、30个蛋白显著上调(P＜0.05);对显著下调蛋白进行GO分析,谷胱甘肽代谢、蛋白质稳定等信号通路被显著富集;对显著下调蛋白进行GSEA分析,谷胱甘肽代谢通路被显著富集.与GFP-AngⅡ组比较,Vehicle-GFP组H9c2细胞中SOD和CAT活性降低,MDA活性增高(P＜0.05或P＜0.001);与Vehicle-CTHRC1组比较,CTHRC1-AngⅡ组H9c2细胞中SOD和CAT活性降低,MDA活性增高(P＜0.01或P＜0.001);与GFP-AngⅡ组比较,CTHRC1-AngⅡ组H9c2细胞中SOD和CAT活性降低,MDA活性增高(P＜0.05或P＜0.001).结论:体外过表达CTHRC1可加重AngⅡ诱导的病理性心肌重构,其功能与抑制谷胱甘肽代谢通路有关.
关键词：心肌重构胶原三螺旋重复蛋白1氧化应激富集分析谷胱甘肽代谢实验研究
资助基金：国家自然科学基金(No.82160058)临床新技术推广项目(No.YSXH2024KYF049)内蒙古医科大学教育教学改革研究与实践项目(No.NYJXGGSJ2024024)
论文发表日期：2026-03-25
在线出版日期：2026-04-07（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 869-877 )
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