木聚糖酶重组菌株的筛选及其分泌表达的比较分析
张会
樊俊博
马佳欣
李柱
邵志伟
李杰
东北农业大学生命科学学院,黑龙江 哈尔滨 150030
摘要：为了进一步提高木聚糖酶(Xylanase,XynB)的分泌表达量,该研究以黑曲霉内源高表达的糖化酶(Glucoamylase,GlaA)位点作为基因整合靶点.基于glaA基因六拷贝强启动子,分别利用糖化酶信号肽SglaA和酸性蛋白酶B(Acid Protease B,PepB)信号肽SpepB调控XynB的表达与分泌,并探讨缺失高背景蛋白酸稳定α-淀粉酶(Acid-stable Amylase,AsAA)对XynB分泌的影响.结果显示,重组菌株TgX、TpX、ΔAgX和ΔApX在约22 kDa处均显现出明显的XynB蛋白条带.其中,菌株ΔApX的木聚糖酶活性(21 413.74 U/mL)较菌株TgX、TpX及ΔAgX提高了 70.67%、14.92%和 35.42%.信号肽对xynB基因及UPR标志基因的转录水平无显著影响.缺失高背景蛋白AsAA能够提升xynB基因的转录水平,促进重组蛋白质的折叠与分泌,从而改善内质网应激.综上,该研究基于高效分泌信号肽和敲除高背景蛋白成功优化和提高了XynB在黑曲霉中的表达,为后续持续提升XynB的研究奠定了基础.
关键词：木聚糖酶黑曲霉信号肽分泌表达
资助基金：中国博士后科学基金(2019M651149)
论文发表日期：2025-11-20
在线出版日期：2025-12-26（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 99-107 )
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