摘要：目的 探讨清肾颗粒对叶酸诱导的肾纤维化小鼠模型及转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的HK-2细胞的作用及其调控糖酵解重编程、乳酸累积和组蛋白 H3K18 乳酸化的机制.方法 构建叶酸诱导的肾纤维化小鼠模型,分为正常组、模型组和清肾颗粒组(4.0 g·kg-1·d-1),6只/组,灌胃4周.HE 和 Masson 染色观察肾组织病理;Western blotting检测肾组织纤维化标志(α-SMA、FN、E-cad)、糖酵解关键蛋白(HIF-1α、HK2、PFKM、PKM2、LDHA)及组蛋白乳酸化相关蛋白(Pan Kla、H3/H4 乳酸化位点)表达;免疫荧光检测 α-SMA、FN、E-cad、LDHA、H3K18la表达;ELISA检测血清肌酐(SCR)、尿素氮(BUN);比色法检测肾组织乳酸含量.细胞实验:构建TGF-β1刺激下的HK-2细胞模型,SD大鼠灌胃制备清肾颗粒含药血清用于细胞实验,分为正常组、模型组和清肾颗粒含药血清组.CCK-8测细胞活力,EdU染色检测增殖;Western blotting检测细胞内 α-SMA、E-cad、LDHA、H3K18la表达;Seahorse XFe96 检测细胞外氧耗率(OCR)和细胞外酸化率(ECAR);比色法检测细胞内乳酸含量.结果 肾脏病理检查提示,与模型组相比,清肾颗粒可以明显减轻小鼠肾组织纤维化(P<0.05).与模型组相比,清肾颗粒组小鼠肾组织中α-SMA、FN、HIF-1α、HK2、PFKM、PKM2、LDHA、Pan Kla、H3K18la 表达均显著减少,E-cad 表达显著增加(P<0.05).与模型组相比,清肾颗粒组肾组织内 α-SMA、FN、LDHA 表达显著减少,E-cad 表达显著增加(P<0.05),且LDHA与H3K18la在肾小管的共定位水平降低.此外,与模型组相比,清肾颗粒组小鼠血清 Scr、BUN 水平及肾组织内乳酸含量均显著降低(P<0.05).细胞实验中,与模型组相比,清肾颗粒含药血清提高细胞活力、促进细胞增殖(P<0.05).与模型组相比,清肾颗粒含药血清组细胞内α-SMA、LDHA、H3K18la 表达减少(P<0.05);同时显著提高细胞外OCR、降低ECAR,减少细胞内乳酸含量(P<0.05).外源性补充乳酸后,与清肾颗粒含药血清组相比,细胞内LDHA、H3K18la及α-SMA的抑制作用被显著逆转(P<0.05).结论 清肾颗粒通过调控糖酵解重编程、减少乳酸堆积及抑制组蛋白H3K18乳酸化,发挥减轻肾纤维化的作用.

摘要：目的 修订适合中国文化背景下使用的Liebowitz儿童和青少年社交焦虑量表(LSAS-CA),检验其在中国青少年中的信效度.方法 使用LSAS-CA对广东省某职业高中的2103名学生(男生917人,女生1186人,平均年龄16.73±1.24岁)进行线上问卷调查,并进行项目分析和信效度检验;同时采用青少年社交焦虑量表(SAS-A)、病人健康问卷(PHQ-9)和特质性事后加工过程量表(PEPI-T)作为效标效度;采用自尊量表(RSES)进行区分效度检验.3个月后对其中210名学生重测,检验LSAS-CA的重测信度.结果 中文版LSAS-CA共24个条目,包括12个社交互动情景和12个表现情景,分别评定焦虑和回避程度,共48个评分项.通过验证性因子分析,比较4个竞争模型(单维、双维、双因子模型以及高阶因子模型)的拟合情况.双因子模型更能解释量表结构:焦虑因子(χ²=3168.263,DF=224,χ²/DF=14.144,RMR=0.022,GFI=0.875,AGFI=0.832,PGFI=0.653,NFI=0.931,TLI=0.921,CFI=0.936,RMSEA=0.079)和回避因子(χ²=3144.601,DF=216,χ²/DF=14.558,RMR=0.019,GFI=0.875,AGFI=0.826,PGFI=0.630,NFI=0.944,TLI=0.933,CFI=0.948,RMSEA=0.080)模型拟合指数均尚可接受.结论 本研究修订的中文版LSAS-CA在中国文化背景下表现出可接受的信效度,为国内学者研究青少年社交焦虑提供了更加便捷的测量工具,以促进研究进展与干预实践.

摘要：目的 研究黄芩清热除痹胶囊(HQC)调控LncRNA EBLN3P/miR-369-3p/NFIX 轴干预类风湿关节炎(RA)中JAK/STAT驱动的滑膜血管生成的作用机制.方法 通过优化干预策略构建类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞/人脐静脉内皮细胞(RA-FLS/HUVEC)协同培养模型,采用梯度浓度含HQC血清(2.5%～30%,干预24～72 h)、LncRNA EBLN3P过表达及基因-药物联合处理,利用CCK-8法筛选共培养体系的最佳血清浓度与干预时长.通过EdU增殖实验、Transwell侵袭实验及细胞划痕实验评估HQC对RA-FLS病理活化的抑制作用,ELISA定量分析血管生成因子(VEGF、FGF2)及基质金属蛋白酶(MMP9、MMP2)表达水平,管腔形成实验联合免疫荧光技术检测RA-FLS诱导的HUVEC血管生成能力及内皮标志物(CD34、CD105)表达变化,qRT-PCR及Western blotting解析信号通路关键分子(LncEBLN3P、miR-369-3p、NFIX、JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3)的mRNA或蛋白表达动态.结果 共培养体系优化作用条件(细胞比例5:1,时间48 h)模型中,与对照组相比,模型组RA-FLS的恶性行为(增殖、侵袭及迁移能力)显著增强(P<0.01),促血管生成因子(VEGF、FGF2)与基质降解酶(MMP2、MMP9)表达显著上调(P<0.01),LncEBLN3P/miR-369-3p/NFIX轴异常激活,miR-369-3p表达受抑制(P<0.01),而LncEBLN3P、NFIX及下游JAK2/STAT3通路关键分子(JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3)表达均显著升高(P<0.01).经HQC干预后,模型组RA-FLS恶性行为受抑(P<0.01),促血管因子及基质降解酶表达下调(P<0.01),且LncEBLN3P/miR-369-3p/NFIX-JAK/STAT轴被抑制(miR-369-3p表达升高,P<0.01;LncEBLN3P、NFIX、JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3表达均下调,P<0.01).在LncRNA EBLN3P过表达(OE-Lnc)模型中,HQC仍可部分逆转其诱导的病理表型及通路激活(P<0.01 vs OE-Lnc组),但与单纯HQC处理组相比,OE-Lnc+HQC联合处理组对细胞恶性行为及通路活化的抑制作用显著减弱(P<0.01).结论 HQC含药血清可能通过靶向LncRNA EBLN3P/miR-369-3p/NFIX轴抑制JAK/STAT通路,从而抑制RA-FLS的促血管生成功能.

摘要：目的 探索内侧前额叶皮层(mPFC)谷氨酸能神经元在艾司氯胺酮缓解慢性束缚应激(CRS)模型小鼠抑郁样行为中的调控作用.方法 选用150只雄性C57BL/6J小鼠,随机分为15组(10只/组).研究艾司氯胺酮对CRS模型小鼠抑郁样行为的影响时,分为Control+生理盐水(Saline)组、Control+艾司氯胺酮(Sket)组、CRS+Saline组和CRS+Sket组;研究艾司氯胺酮抗抑郁样行为中mPFC区谷氨酸能神经元活性变化时,分为Control+Saline组、CRS+Saline组和CRS+Sket组;研究调控mPFC区谷氨酸能神经元对CRS模型小鼠抑郁样行为的影响时,分为mCherry+Saline组,mCherry+氯氮平-N-氧化物(CNO)组,hM3Dq+CNO组和hM4Di+CNO组;研究艾司氯胺酮是否通过调控mPFC区谷氨酸能神经元发挥抗抑郁作用时,分为mCherry+Saline组、mCherry+Sket组、hM3Dq+Sket组和hM4Di+Sket组.构建CRS模型模拟小鼠的抑郁状态,通过悬尾实验、强迫游泳实验以及糖水偏好实验测试小鼠的抑郁样行为,化学遗传学调控mPFC区谷氨酸能神经元活性,免疫荧光染色观察mPFC区谷氨酸能神经元活性变化.结果 与CRS+Saline组相比,CRS+Sket组小鼠的悬尾及强迫游泳实验中的不动时间明显降低,且糖水偏好率显著升高(P<0.001),且CRS+Sket组的小鼠脑切片中谷氨酸能神经元 c-Fos 表达量明显高于CRS+Saline组(P<0.01).与mCherry组相比,hM3Dq组的小鼠悬尾及强迫游泳实验中不动时间明显减少,且糖水偏好率显著增加(P<0.01),而hM4Di组小鼠的差异无统计学意义(P>0.05).在均注射艾司氯胺酮的小鼠中,与mCherry组相比,hM4Di组的小鼠悬尾及强迫游泳实验中不动时间明显增加,且糖水偏好率显著减少(P<0.001),而hM3Dq组小鼠的差异无统计学意义(P>0.05).结论 艾司氯胺酮通过激活mPFC区谷氨酸能神经元,改善CRS模型小鼠的抑郁样行为.

摘要：目的 探讨变应原对变应性鼻炎(AR)患者血液CCR3+粒细胞亚型活化的影响.方法 流式细胞术检测变应原对AR患者血液粒细胞群CCR3+CD203c-嗜酸性粒细胞和CCR3+CD203c+嗜碱性粒细胞活化分子CD63和CD203c表达水平的影响.多重免疫荧光分析和ELISA技术分别检测志愿者血浆IL-25和TSLP的水平,并分析其与嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞数量的相关性.转录组测序AR患者血液CD16-粒细胞,并富集分析其差异表达基因的功能和潜在机制.结果 AR患者CCR3+粒细胞中嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的比例增加(P<0.005),变应原诱导嗜碱性粒细胞的比例增加(P<0.005).季节性AR(sAR)和常年性AR(pAR)而非皮肤点刺试验阴性的AR(nAR)患者血液粒细胞群中嗜酸性粒细胞CD63的平均荧光强度表达水平增强(P<0.005),变应原诱导pAR患者嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞CD63和CD203c平均荧光强度的表达水平增强(P<0.005).AR患者升高的血浆IL-25和TSLP水平与增加的嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的数量相关(均P<0.005).皮肤点刺试验阳性AR患者CD16-粒细胞差异表达的3999个基因在蛋白合成、能量代谢和免疫功能等方面发生了潜在变化,内吞作用、吞噬体和碳代谢等通路可能参与上述变化.结论 本研究深化了对血液粒细胞群中CCR3+嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞参与皮肤点刺试验阳性AR发病机制的理解,揭示了AR治疗的潜在靶点.

摘要：目的 探讨基于生命八要素(LE8)的心血管健康评分对急性缺血性脑卒中(AIS)患者90 d功能预后的影响,探究相关实验室指标在其中的中介作用.方法 采用多中心前瞻性队列研究设计,纳入发病72 h内的急性缺血性脑卒中患者.收集患者临床资料,依据美国心脏协会定义的LE8标准计算心血管健康评分.通过电话随访及评估患者发病后90 d的功能预后.及改良Rankin量表(mRS)评分.应用多重线性回归分析LE8总评分及各单项评分与90 d mRS评分的关系.采用Lasso回归筛选与90 d mRS评分相关的实验室指标,并通过Bootstrap法进行中介效应分析,探究筛选出的指标在LE8评分与卒中预后关系中的中介作用.结果 共纳入599例患者,校正混杂因素后,LE8总评分与90 d mRS评分呈负相关(β=-0.05,95%CI:-0.06,-0.041,P<0.001);LE8各单项评分:运动、饮食质量、尼古丁暴露、睡眠、体质量指数、胆固醇、血压均与90 d mRS评分呈负相关(P<0.05).影响90 d mRS的检验指标中,纤维蛋白原(FIB)水平(β=0.215;95%CI:0.068,0.361;P=0.0041)与90 d mRS评分呈正相关,MCHC(β=-0.012;95%CI:-0.022,-0.002;P=0.0229)及HRR(β=-0.007;95%CI:-0.013,0.00;P=0.042)与90 d mRS评分呈负相关.中介效应分析显示,FIB在 LE8评分与90 d mRS评分的关系中起显著中介作用,间接效应为-0.0019(95%CI:-0.00381,0.00,P=0.006),中介效应比例为3.778%(95%CI:0.00869,0.08).结论 基于LE8评分的心血管健康评分与AIS患者90 d功能预后呈负相关,提示维持良好的心血管健康水平对改善卒中预后至关重要.血凝及炎症相关指标FIB及红细胞参数MCHC、HRR与预后不良相关,其中FIB在LE8评分影响卒中预后的过程中发挥部分中介作用,为卒中二级预防提供依据.

摘要：目的 研究AKT1/GLUT1信号通路在益气解毒方抗鼻咽癌中的作用.方法 采用分子对接技术分析益气解毒方活性成分与AKT1的结合能力,MTT及RTCA法检测细胞增殖能力,划痕愈合实验检测细胞迁移能力,Matrigel侵袭小室法检测细胞侵袭能力,Western blotting法检测蛋白的表达变化.鼻咽癌裸鼠移植瘤模型分为对照组(等体积生理盐水灌胃)、益气组(以15.357 g·kg-1·d-1的益气解毒方灌胃)、5-Fu组(腹腔注射8 g·kg-1·d-1的5-氟尿嘧啶),10只/组,5-Fu组每2 d腹腔注射1次,其余2组灌胃1次/d,共给药18 d.结果 与溶剂组比较,益气解毒方组细胞增殖速度、迁移和侵袭能力显著下降(P<0.05),p-AKT、GLUT1、XIAP、N-cadherin及Vimentin表达下调(P<0.05);与单用益气解毒方组相比,GLUT1或AKT1激活剂与益气解毒方联用组细胞增殖速率提高,迁移和侵袭能力增强(P<0.05),XIAP、N-cadherin及Vimentin表达上调(P<0.05);在鼻咽癌裸鼠移植瘤模型中,益气解毒方显著抑制肿瘤的生长并下调了肿瘤组织中AKT、p-AKT和GLUT1的表达(P<0.05).结论 益气解毒方抑制鼻咽癌细胞增殖、侵袭和迁移的机制与AKT1/GLUT1信号通路有关.

摘要：目的 探讨黄芪总苷(AST)对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的星形胶质细胞肿胀的影响及其潜在分子机制.方法 取2 d龄SD大鼠的乳鼠,共48只,随机分为4组,12只/组.从乳鼠大脑中提取原代星形胶质细胞,经OGD/R诱导损伤后,分别给予AST或AST联合P38激动剂U-46619处理.实验设置对照组、OGD/R组、AST组以及AST+U-46619组.其中,AST组在OGD/R处理前及过程中用AST处理细胞;AST+U-46619组在OGD/R处理前及过程中用AST和U-46619共同处理细胞.通过细胞体积检测、形态观察、活性氧物质(ROS)检测和乳酸脱氢酶(LDH)活性测定评估各组细胞的肿胀、ROS水平和损伤程度;采用免疫荧光共聚焦显微镜显示细胞膜上水通道蛋白4(AQP4)的蛋白表达情况;Western blotting检测P38信号通路的磷酸化水平及细胞膜上AQP4蛋白的表达水平.结果 与OGD/R组相比,AST处理降低了OGD/R损伤引起的星形胶质细胞体积增加(P<0.05)、ROS水平(P<0.05)和LDH释放量(P<0.05),改善了细胞形态变化,抑制了细胞膜上AQP4的过度聚集,降低了P38的磷酸化水平(P<0.05)和细胞膜上AQP4蛋白表达(P<0.05).然而,U-46619与AST联合处理可逆转AST对细胞体积、形态、LDH水平、P38磷酸化和AQP4表达水平的影响(均P<0.05).结论 AST缓解OGD/R后星形胶质细胞水肿,其分子机制可能为抑制细胞中ROS产生和抑制P38信号通路激活,从而降低了AQP4在细胞膜上过度表达.

摘要：目的 探讨炎症蛋白与阿尔茨海默病(AD)之间的因果关系,并评估血浆代谢物在该关系中的中介作用.方法 采用孟德尔随机化(MR)方法进行分析.研究利用公开可获得的全基因组关联研究(GWAS)数据,选取91种炎症蛋白强相关且无反向因果关系的单核苷酸多态性(snp)作为暴露,以AD为结局,进行双向双样本MR分析.通过逆方差加权法(IVW)筛选出与AD存在因果关系的炎症蛋白,进一步基于中介MR分析,以1400种血浆代谢物作为中介变量,评估代谢物在炎症蛋白对AD因果效应中的中介作用.结果 初步双向MR分析识别出3种与AD存在潜在正向因果关联且无反向因果关联的炎症蛋白,分别是Axin-1、C-X-C基序趋化因子11(CXCL11)及白细胞介素-12β(IL-12β).其中,Axin-1水平升高与AD风险呈潜在正向因果效应(OR=1.082,95%CI:1.009～1.159,P=0.026),而CXCL11(OR=0.951,95%CI:0.914～0.990,P=0.026)和IL-12β(OR=0.959,95%CI:0.926～0.994,P=0.026)与AD风险则呈潜在负向因果效应.敏感性分析表明,这些因果关联均无异质性和多效性.在中介分析中,筛选出18种与AD具有潜在因果关联的血浆代谢物,其中3种血浆代谢物在炎症蛋白-AD因果中具有中介效应.甲基-4-羟基苯甲酸硫酸盐在Axin-1与AD之间起到部分中介作用(占比为20.10%).孕烯三醇硫酸盐在CXCL11与AD之间起到部分中介作用(占比为18.20%).亚精胺/鸟氨酸比值在IL-12β与AD之间起到重要中介作用,中介效应占比为43.40%.结论 本研究首次揭示了特定炎症蛋白通过血浆代谢物影响AD风险的潜在机制,为AD的炎症-代谢交互机制提供了遗传学证据,为AD的早期检测和干预提供了潜在的生物标志物和靶点.

摘要：目的 探讨环鸟苷酸-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激蛋白(cGAS-STING)激活剂增强自然杀伤细胞(NK细胞)杀伤胃癌细胞的分子机制.方法 使用NK-92系细胞,在X-VIVO15培养基中培养至1×106/mL,放入CO2培养箱中进行培养;将胃癌细胞系(MGC-803细胞、MKN-45细胞)在RPMI 1640培养基中培养;5、1、0.2 μmol/L的cGAMP激动剂与准备好的NK-92系共培养24 h;通过q PCR、ELISA法检测NK-92系细胞与肿瘤细胞共培养后细胞因子IFN-γ的表达情况;将培养好的NK-92系细胞与用CellTracker™CM-DiI染料标记的肿瘤细胞以不同的比值(1∶1、2∶1和4∶1)进行共培养,通过死细胞染色试剂盒测定肿瘤细胞活力;最后通过流式细胞杀伤术检测NK-92系的杀伤程度.结果 cGAS-STING激动剂cGAMP可剂量依赖性增强NK-92系细胞IFN-γ、TNF-α等促炎细胞因子的mRNA表达与分泌(P<0.01),上调细胞表面活化受体(NKp36、NKp44等)表达,激活STING-TBK1-IRF3信号通路;体外实验中,cGAMP预处理的NK-92系细胞对MGC-803、MKN-45胃癌细胞杀伤率升高,且该效应可被STING阻断剂H-151逆转;小鼠荷瘤体内实验中,cGAMP联合NK细胞治疗使裸鼠胃癌移植瘤质量下降约40%(P<0.05)、生长减缓.结论 cGAS-STING通路可增强NK细胞分泌IFN-γ能力,进而提升其对胃癌细胞的杀伤作用,为NK细胞联合STING激动剂治疗胃癌提供了理论依据.

摘要：目的 探讨树豆酮酸A衍生物XJ-60是否可通过抑制SP1/TGF-β/Smad3信号通路发挥改善非酒精性脂肪肝肝纤维化的作用.方法 体内实验:12只db/db小鼠采用完全随机设计分成非酒精性脂肪肝模型组(NAFLD组)和给药组(XJ-60组),6只/组;db/m小鼠为正常对照组(NC组),6只/组,XJ-60组给予XJ-60 50 mg/(kg/d)灌胃给药.HE、油红O染色和组织上清液丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)判断NAFLD成模情况;免疫组织化学染色观察肝组织中特异性蛋白1(Sp1)、纤连蛋白(FN)的表达部位,Western blotting观察肝组织中Sp1、上皮细胞向间充质细胞转分化(EMT)、细胞外基质(ECM)相关指标的表达情况;ELISA检测肝组织中白介素-6(IL-6)的表达;Sp1与钙黏蛋白(E-ca)和Sp1与α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)进行相关性分析.体外实验:采用CCK8法筛选XJ-60治疗NAFLD的有效浓度;AML12细胞分为正常对照组(NC组),NAFLD模型组(PO组)采用游离脂肪酸刺激复制模型;溶剂对照组(PO+DMSO组)在PO组的基础上加入与XJ-60相同剂量的DMSO作对照;药物治疗组(PO+XJ-60组)加入游离脂肪酸后加入不同浓度梯度的XJ-60.油红O染色观察各组肝细胞脂滴沉积情况;Western blotting和Real-time qPCR检测各组SP1、转化生长因子-β(TGF-β)、Smad3、p-Smad3、EMT、ECM相关指标的表达情况;免疫荧光染色观察SP1、p-Smad3定位情况;并通过敲低SP1验证TGF-β/Smad3信号轴在NAFLD中的作用.结果 体内实验结果表明XJ-60可降低db/db小鼠甘油三酯和总胆固醇(P<0.05);模型组HE、油红O染色以及ALT、AST提示存在肝细胞损伤且肝脏脂滴沉积模型复制成功(P<0.05);NAFLD组小鼠肝脏已出现炎性 细胞浸润和纤维化表型,XJ-60组有所改善;XJ-60组IL-6降低(P<0.05);FN、SP1分别在细胞质和细胞核中表达增多;相关性分析结果提示Sp1和E-ca呈负相关和α-SMA呈正相关(P<0.05).体外实验中XJ-60治疗NAFLD最佳浓度为10 μmol/L(P<0.01),且PO组AML12细胞中的脂滴沉积增多,XJ-60组脂滴沉积减少(P<0.01);与PO组相比,XJ-60治疗后ECM和EMT相关指标mRNA水平和蛋白水平表达均降低(P<0.05),SP1、TGF-β、p-Smad3蛋白表达水平降低(P<0.05).敲低SP1可显著降低TGF-β、p-Smad3和ECM的表达(P<0.05).结论 XJ-60在db/db小鼠NAFLD肝脏中发挥的抗纤维化作用及改善脂滴沉积的作用机制可能是通过抑制SP1的表达从而抑制TGF-β/Smad3信号通路致纤维化作用,减少下游细胞外基质的分泌和沉积.

摘要：目的 研究异牡荆素(ISO)对糖尿病小鼠心肌的保护作用及机制.方法 选用成年雄性C57小鼠18只,随机分为对照组、糖尿病组(DM)和DM+ISO组(n=6).分离新生小鼠原代心肌细胞(NMCMs),分为对照组、高糖组(HG,33 mmol/L葡萄糖)、HG+ISO组及HG+ISO+3-TYP组(SIRT3抑制剂).HE染色评估心肌损伤;ELISA检测心肌丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;免疫组化和荧光检测iNOS、NOX2、8-OHdG表达;Western blotting分析NRF2、NOX2、NQO1、SIRT3等通路蛋白;流式细胞术定量活性氧水平.结果 与对照组相比,DM组心肌细胞炎症浸润增加,白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),α-肿瘤坏死因子(TNF-α)水平升高(P<0.01),NQO1,NRF2,SIRT3蛋白水平下降(P<0.01),NOX2,AC-SOD2蛋白水平增加(P<0.01),与DM组相比,DM+ISO组心肌细胞炎症浸润减少,IL-1β,IL-6,TNF-α水平下降(P<0.01),NQO1,NRF2,SIRT3蛋白水平恢复(P<0.01),NOX2,AC-SOD2蛋白水平减少(P<0.01).结论 ISO可通过促进SIRT3表达,有效减轻氧化应激来减缓糖尿病心肌损伤,从而显著改善糖尿病心肌病.

摘要：目的 优化白芍提取工艺,建立白芍提取物(BST)多指标含量检测方法,并初步探讨其对小鼠黑色素瘤细胞(B16F10)的酪氨酸酶(TYR)活性抑制作用和对人永生化表皮细胞(HaCaT)中ROS水平的降低作用,并对BST对体内小鼠模型治疗效果进行评估.方法 以分子对接手段确定潜在TYR抑制剂成分为没食子酸、甘草苷及芍药苷;采用高效液相色谱法(HPLC)建立BST液相图谱,测定3种潜在TYR抑制剂的含量,并进行方法学验证;通过熵权法计算3种潜在TYR抑制剂的含量、TYR抑制活性及DPPH及自由基清除能力的综合评分作为响应值,采用单因素结合响应面分析法考察溶剂配比、液料比、提取时间以及粉碎目数等因素对BST提取工艺的影响,以确定最优提取工艺;通过设置黑色素-酪氨酸酶B16F10细胞实验空白组(正常培养)、模型组(α-MSH处理)、给药组(α-MSH+BST)、Hacat细胞体外抗氧化活性试验空白组[正常培养,模型组双氧水(H2O2)处理)、给药组(H2O2+BST处理)以验证作用机制.通过UVB辐射暴露系统建立小鼠黑色素瘤模型,BST(100、150、200 mg/kg)给予0.2 mL的混悬液灌胃,结合观察实验动物背部皮肤状态、Fontana-Masson银染色结果以及检测血清样本中参与调控黑色素生成、转运或代谢及抗炎相关细胞因子水平指标综合评估BST体内美白作用效果.结果 分子对接结果显示BST中潜在TYR抑制剂与TYR蛋白结构的残基存在相互作用关系,建立了BST潜在TYR抑制剂的HPLC含量测定方法,方法学验证表明该方法稳定可行;单因素-响应面实验表明BST最优提取工艺为提取溶剂50%乙醇,液料比1∶15,提取时间1h,粉碎目数20目;BST对DPPH自由基以及羟自由基具有直接清除作用,能显著减少细胞中黑色素的形成并提高B16细胞内TYR蛋白的相对含量并降低HaCat细胞中ROS水平,并在体内通过抑制TYR与TNF-α(P<0.01)直接抑制黑色素合成关键酶与间接抗炎的双重美白机制,双向调节色素代谢,有效逆转UVB诱导的皮肤光老化及色素沉着.结论 基于单因素响应面法优化的BST提取工艺稳定可靠、预测性良好,药理分析研究表明BST的美白作用可能是通过抑制TYR活性和调节氧化应激和炎症通路的双向调节机制而实现的.

摘要：目的 基于磷脂酰肌醇-3-激酶蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路,通过对慢传输型便秘(STC)大鼠结肠Cajal间质细胞(ICCs)胞葬过程的变化进行评价,探索化瘀通便汤对慢传输型便秘的作用机制.方法 取SD大鼠采用盐酸洛哌丁胺混悬液灌胃法制备STC模型,随机分为模型组、化瘀通便汤中药低剂量组、化瘀通便汤中药中剂量组、化瘀通便汤中药高剂量组、阳性药物(莫沙必利)组,每组12只,另取12只SD大鼠灌胃等剂量生理盐水设为空白组.测量各组大鼠首次黑便时间、粪便含水率、肠道推进率;通过透射电镜观察分析Cajal间质细胞超微结构,计算线粒体空泡率;免疫荧光实验检测各组大鼠巨噬细胞吞噬率;HE染色检测各组大鼠结肠病理形态;免疫组织化学(IHC)染色检测各组大鼠结肠组织酪氨酸蛋白激酶受体(c-Kit)表达水平;Western blotting法检测大鼠结肠c-Kit、整联蛋白相关蛋白(CD47)、PI3K、Akt蛋白含量,分析各项指标与胞葬作用的相关性.结果 与空白组比较,模型组大鼠出现典型的便秘症状,Cajal间质细胞超微结构明显损坏,大鼠结肠黏膜出现明显病理损伤,首次黑便时间、线粒体空泡率、CD47、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达水平明显升高(P<0.01),粪便含水率、肠道推进率、c-Kit蛋白表达水平明显降低(P<0.01),吞噬率两组无明显差异.与模型组比较,化瘀通便汤中药各剂量组大鼠Cajal间质细胞超微结构形态基本正常,大鼠结肠黏膜病理损伤明显减轻,粪便含水率、肠道推进率、吞噬率、c-Kit蛋白表达明显升高(P<0.05),首次黑便时间、线粒体空泡率、CD47、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白含量均降低(P<0.05),其中,化瘀通便汤中药高剂量组结果最为显著(P<0.01).结论 化瘀通便汤可能通过抑制PI3K、Akt的磷酸化,下调CD47蛋白表达,提高巨噬细胞吞噬率,从而促进Cajal间质细胞的胞葬过程,发挥对慢传输型便秘的治疗作用.

摘要：目的 针对现有人工智能方法在复杂异质生物网络建模中难以挖掘网络节点间的协同关系、提取高阶拓扑语义特征等问题,本文提出一种异质图动态特征学习的药物重定位预测方法.方法 该方法首先构建融合药物、疾病及其交互关系的异质生物图模型.设计动态门控注意力模块,结合动态图注意力机制动态提取药物与疾病的判别性拓扑特征.设计门控残差特征融合机制,精准融合多源相似性网络中的结构和语义信息,有效缓解特征冗余与信息缺失的问题,实现药物与疾病关联的精准预测.结果 在多个数据集上的实验和案例分析表明,本文药物重定位预测方法的性能优于现有主流模型.结论 所提方法可有效建模异质生物网络中的复杂关联关系,提升药物重定位预测的准确性,为复杂疾病的精准治疗和医学人工智能提供重要的技术支持.

摘要：心血管疾病(CVD)是全球主要的死亡原因之一,具有高发病率和死亡率,代谢性疾病是CVD的重要危险因素.近年来,越来越多的研究表明,肠道菌群在代谢性疾病和CVD的发生、发展及病理机制中扮演着重要角色.嗜黏蛋白阿克曼菌(A.muciniphila)是一种有潜力的二代益生菌,因其独特的代谢功能和免疫调节特性而备受关注.本文系统阐述A.muciniphila通过改善肠道屏障功能、调节脂质与葡萄糖代谢、增加短链脂肪酸生成、抑制炎症反应等多种途径,对代谢性疾病产生积极影响.同时,A.muciniphila也参与抗动脉粥样硬化、血压调控、减轻心房颤动和肺动脉高压等心血管保护过程,其机制涉及免疫调节、代谢物调控及肠道-心血管轴的多重交互,为相关疾病的干预提供了新的微生物靶点与策略.

摘要：目的 探讨利奈唑胺(LZD)联用血必净对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染引起的小鼠肺炎的协同保护作用及作用机制.方法 通过气管滴注MRSA菌液构建肺炎小鼠模型.将60只SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为6组(n=10):对照组、模型组、血必净单药组(13 mL·kg-1·d-1)、LZD单药组(80 mg·kg-1·d-1)、血必净+LZD低剂量组(血必净 6.5 mL·kg-1·d-1+LZD 80 mg·kg-1·d-1)及血必净+LZD高剂量组(血必净 13 mL·kg-1·d-1+LZD 80 mg·kg-1·d-1).通过体外抑菌实验和溶血活性实验检测血必净和LZD对MRSA的最小抑菌浓度(MIC)及对MRSA生长曲线及溶血活性的影响.通过HE染色观察肺组织病理学改变,ELISA法检测肺匀浆中炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β和IL-18含量.qPCR实验检测MRSA Hla、NLRP3、Caspase-1和ASC的mRNA水平.Western blotting实验分析MRSA Hla、NLRP3、Caspase-1和ASC蛋白表达.免疫组织化学法检测各组小鼠肺组织NLRP3、Caspase-1和ASC蛋白表达量.结果 LZD联用血必净可提高MRSA肺炎小鼠的生存率,降低MRSA肺炎小鼠的肺组织炎症细胞浸润及肺损伤评分(P<0.01);LZD联用血必净降低MRSA肺炎小鼠肺匀浆的IL-6、TNF-α、IL-1β和IL-18的含量(P<0.05),并抑制小鼠肺组织MRSA Hla、NLRP3、Caspase-1和ASC的mRNA水平和蛋白的表达(P<0.05).血必净对MRSA无抑菌活性,且对MRSA的增殖无抑制作用,但可在体内外抑制MRSA分泌α-溶血素(Hla),进而通过NLRP3相关通路作用抑制炎症反应,而LZD无此作用.结论 LZD与血必净联用可增强其改善MRSA肺炎的药效,其机制可能为血必净可通过抑制α-溶血素分泌进而降低NLRP3介导的炎症反应.

摘要：目的 建立一种人血清中类固醇激素的高灵敏度、高特异性液相色谱-质谱串联法(LC-MS/MS)分析方法.方法 采用固相萃取(SPE)法进行样本前处理,优化LC-MS/MS确保痕量激素的准确检测.经验证方法的线性范围、正确度、精密度等指标后,将该方法应用于正常妊娠人群血清样本的检测,分析孕早、中、晚期血清中32种类固醇激素的动态变化规律.结果 线性范围为0.001～7500 ng/mL,检出限(LOD)为0.0007 ng/mL,日内和日间变异系数(CV)均小于10%,加标回收率在为86.21%～112.67%,方法的萃取效率为85.05%～106.3%,基质效应为85.60%～113.22%.将该方法应用于妊娠期类固醇激素动态分析发现,多数激素(如11-脱氧皮质醇、11β-羟孕酮、硫酸脱氢表雄酮、雌三醇等)水平随妊娠进展显著上升(P<0.05),提示其与胎儿-胎盘功能发育密切相关;部分激素在孕晚期升高(P<0.05),可能与母体适应性调节及胎儿肾上腺功能成熟有关.结论 本研究基于LC-MS/MS技术建立了32种类固醇激素高灵敏度检测方法,揭示了妊娠期间类固醇激素的动态变化规律,为相关生理与病理机制研究提供了基础.

摘要：目的 探究饮茶、饮酒等生活习惯对胃肠疾病的影响与关联关系,并以此建立胃肠疾病早期风险预测和辅助问诊大模型,实现早期胃肠道疾病高风险识别与智能诊疗推荐.方法 对安溪县中医院消化内镜中心同时进行胃镜检查与13C尿素呼气试验的患者进行调查研究.先对数据进行标量分析,以确定特征选取是否合适.将数据按7∶3随机分为训练集和测试集,应用人工智能和机器学习方法:支持向量机、K近邻、逻辑回归、随机森林极限梯度提升和深度神经网络(DNN),以寻找最佳分类器用于预测胃肠道高风险病症.使用贝叶斯优化算法,获取6种模型的最优超参数组合,进行模型拟合,并应用Shapley加法解释方法对最佳模型进行可解释性分析.选用DeepSeek-R1为基础语言模型,利用胃肠病与中文医疗在线问诊数据集进行参数微调,构建更契合临床实际需求的胃肠疾病问诊大语言模型.结果 本次调查纳入502人,所选取特征与肠胃疾病均具有一定关联性,但仅有年龄特征与胃肠道疾病呈线性相关性(β=0.023,SE=0.008,t=2.942,P=0.003).最佳模型为DNN模型,其准确率为0.68、精确性为0.68、召回率为0.85、F1值为0.75、AUC为0.74.基于DNN模型进行特征重要性排序,前3名为年龄、DOB值和烟龄;构建大语言模型与实际专业医师根据胃镜检查结果所提供的建议高度一致.结论 基于DNN机器学习方法构建的胃肠疾病风险预测模型最佳,可为临床胃肠道疾病进行风险预测并对是否进行胃肠镜检查提供可靠依据,同时表明预防胃肠道疾病发生需禁烟少酒、合理饮茶.构建的肠胃问诊大语言模型可为患者提供更为专业的医学指导,具有较强的临床实用价值.

摘要：目的 探讨泄浊解毒方调节Th17/Treg免疫平衡改善溃疡性结肠炎(UC)的作用机制.方法 将SD大鼠建立UC模型后随机分为模型组、美沙拉秦组(Mesalamine组,0.36 g/kg)、泄浊解毒方高剂量组(XZJD-H组,26.64 g/kg)、泄浊解毒方中剂量组(XZJD-M组,13.32 g/kg)和泄浊解毒方低剂量组(XZJD-L组,6.66 g/kg),10只/组,另取10只大鼠设为空白组.空白组和模型组采用生理盐水灌胃,Mesalamine组和泄浊解毒方各组按照相应的药物和剂量分别灌胃14 d.HE染色观察结肠组织病理改变;ELISA检测血清白细胞介素-6(IL-6)、IL-10、IL-17表达水平;免疫组织化学法(IHC)检测结肠组织IL-6、IL-10、IL-17的表达;免疫荧光法检测结肠组织闭合蛋白、闭锁小带蛋白1(ZO-1)的表达;流式细胞术检测结肠组织中Th17和Treg细胞的比例;RT-PCR检测维甲酸相关孤儿受体(ROR-γt)、叉状头转录因子p3(Foxp3)mRNA表达水平;Western blotting检测结肠组织RORγt、Foxp3蛋白的表达.结果 与空白组比较,模型组出现结肠黏膜损伤、大量炎性细胞浸润等表现,血清IL-6、IL-17含量和结肠组织IL-6、IL-17表达升高(P<0.001),血清IL-10含量和结肠组织IL-10表达降低(P<0.001),Occludin、ZO-1表达水平降低,Th17细胞比例升高(P<0.001),Treg细胞比例降低(P<0.001),RORγt mRNA和蛋白表达增高(P<0.01),Foxp3 mRNA和蛋白降低(P<0.01).与模型组比较,泄浊解毒方组可改善UC大鼠结肠黏膜的炎症反应,降低血清IL-6、IL-17含量,升高IL-10含量(P<0.01),降低结肠组织IL-6、IL-17蛋白的表达(P<0.01),升高IL-10蛋白的表达(P<0.01),升高Occludin、ZO-1的表达,降低结肠组织Th17细胞百分比(P<0.001),升高Treg细胞百分比(P<0.001),降低RORγt mRNA和蛋白表达(P<0.05),升高Foxp3 mRNA和蛋白表达(P<0.05).结论 泄浊解毒方可改善UC大鼠结肠黏膜的病理损伤,其作用机制可能与调节Th17/Treg免疫平衡有关.